兔毛論壇
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李善剛：兩例克隆兔，一顆平常心
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作者:
養(yǎng)兔
時間:
2017-7-22 07:01
標(biāo)題:
李善剛：兩例克隆兔，一顆平常心
7月15日，作為胎兔成纖維細(xì)胞克隆試驗的主持人，李善剛從上海返回北京。在上海，除了看望已經(jīng)健康成長了5個月的“兔寶貝”之外，他也開始了下一步的工作——轉(zhuǎn)基因克隆兔試驗。
4月30日，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所國家畜禽分子遺傳育種中心宣布，來自胎兒成纖維細(xì)胞的克隆兔通過了分子生物學(xué)鑒定，這標(biāo)志著世界上首例胎兔成纖維細(xì)胞克隆試驗在我國獲得成功。
兩個“世界首例”克隆兔
2007年2月12日，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗室，李善剛親自操刀，為克隆兔的“代理媽媽”進行剖腹產(chǎn)，在整個胎兔成纖維細(xì)胞克隆試驗過程中，這是第十次了。
“這一次我們獲得了成功，確實很高興。”時隔5個月，再說起當(dāng)時的心情，李善剛的語氣十分平淡。
“這次的胎兔體細(xì)胞克隆實驗，我們用妊娠期20天的胎兔，剪取它的背部皮膚，進行培養(yǎng)獲得成纖維細(xì)胞系；對成纖維細(xì)胞進行血清饑餓處理后，當(dāng)作供體細(xì)胞與去核的兔卵母細(xì)胞進行電融合，重構(gòu)胚胎激活后培養(yǎng)至4細(xì)胞胚胎；然后移入假孕的母兔，也就是‘代理媽媽’的體內(nèi)；妊娠到期后，對它進行剖腹產(chǎn)，獲得克隆兔。”比起對成功的回味，介紹試驗過程，李善剛講得更加津津有味。
兔子適合研究心血管疾病和眼科疾病及一些遺傳疾病的模型。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因兔有重要的研究價值。但養(yǎng)兔的克隆是一個世界性難題。自克隆羊多利誕生以后，雖然世界多個小組開始克隆兔研究，只有法國國立農(nóng)業(yè)研究院于2002年報道獲得來自性成熟母兔顆粒細(xì)胞的克隆兔。2006年，李善剛領(lǐng)銜完成了世界首例成年公兔耳組織成纖維細(xì)胞的克隆兔試驗。此次用胎兔成纖維細(xì)胞制作獲得存活的克隆兔也是世界首例。
一顆“科研平常心”
在李善剛的電腦中，存著許多克隆兔的照片，但其中一些渾身青紫、一團褶皺的主角，怎樣也無法讓人聯(lián)想到雪白可愛的兔子。
“剛生下來的小兔子就是這樣的，看多了就不會覺得丑了，我第一次見到克隆兔的時候，甚至還覺得它很漂亮呢�！崩钌苿傂χf。
2005年，當(dāng)時在讀博士的李善剛正在進行兔子干細(xì)胞的實驗，一個偶然的機會，他進行了核移植的胚胎的移植工作。也就是這個偶然的機會,他獲得了克隆兔,并進入了克隆兔這個領(lǐng)域,做出了兩個世界首例。
“科研就是這樣，你不可能知道哪個方向一定會出成績，常常是你認(rèn)為這個方向一定能做出來，反而出不來東西�！�
正像李善剛說的，當(dāng)他專注于克隆兔的試驗后，進展并沒有想象中的順利。胎兔成纖維細(xì)胞克隆試驗整整做了十次才成功，但前九次的失敗沒讓他有過絲毫的氣餒�！拔覍φ麄�試驗系統(tǒng)非常的有信心，成功只是時間和運氣的問題。”
曾被稱為“克隆羊之父”的伊恩·威爾莫特在參觀李善剛的實驗室之后，留下一句“Goodluck”。“做動物試驗的人都知道，有時候運氣會跟你開一些玩笑�！崩钌苿傉f，“有時候做一次就能成功，有時候做十次也沒有結(jié)果�！痹谒磥�，搞科研首先要學(xué)會承受失敗，雖然當(dāng)打開克隆兔“代理媽媽”的肚子，如果里面空空如也，心情也會有一時的沮喪。
“科研如果是能夠預(yù)言的，那就不叫科研了，所以保持平常心很重要�！崩钌苿傉f。
兩年練就“體力活兒”
對于無法預(yù)測的事情，李善剛并不強求，但是只要是能夠掌握的，他一定會做到最好。實驗中的每個步驟他都力爭親歷親為，甚至有些“大包大攬”。
每隔一個月，李善剛會從北京飛到上海，一頭扎進實驗室忙個昏天黑地。雖然也曾在上海讀過四年書，但他對上海的了解似乎也僅限于學(xué)校中實驗室和宿舍的兩點一線�，F(xiàn)在到了上海，除了實驗就更沒有別的內(nèi)容了，雖然辛苦，但李善剛也樂在其中。
“做核移植確實挺累的。”李善剛說。
所謂核移植，就是將一個細(xì)胞核用顯微注射等方法移到另一個細(xì)胞里去。前者為供體，可以是胚胎的干細(xì)胞核，也可以是體細(xì)胞的核。受體大多是動物的卵子。因卵子的體積較大，操作容易。因此細(xì)胞核移植技術(shù)，主要是用來研究胚胎發(fā)育過程中，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的功能，以及二者間的相互關(guān)系；探討有關(guān)遺傳，發(fā)育和細(xì)胞分化等方面的一些基本理論問題。
這是整個克隆試驗的關(guān)鍵一步，動輒要在顯微鏡下操作長達七八個小時�！叭褙炞⒌谋３忠粋�姿勢，好幾個小時不活動，你想想那是什么滋味�！庇腥苏f核移植是個精細(xì)活兒，在李善剛看來這其實是個體力活兒，他笑稱，做核移植需要點“功夫”。
為了掌握這門“功夫”，李善剛曾經(jīng)“苦練兩年”，“現(xiàn)在已經(jīng)做得比較順手了，一般情況下，四個小時就能完成。”
然而，“摸索階段”李善剛也出過紕漏，怎么養(yǎng)好小兔子就曾讓他十分頭疼。
“克隆兔順利的生出來并不意味著什么�！崩钌苿傉f，只有兔子健康的過了滿月，才能說明試驗成功。而曾經(jīng)就有小克隆兔因為出生后照料不佳夭折，“如果當(dāng)時懂得怎么科學(xué)喂養(yǎng)，這個實驗可能更早取得成功�！弊阅且院�，李善剛“惡補”兔子的飼養(yǎng)知識，在網(wǎng)上查資料，到養(yǎng)殖場學(xué)習(xí)，很是下了一番功夫。如今，照片中，順利成活的世界第一只胎細(xì)胞克隆兔渾身雪白，體重已達到兩公斤，和它的“代理媽媽”緊緊地靠在一起。
方向明確就沒有壓力
由于核移植實驗在上海進行，李善剛免不了要兩地奔波，再去上海，他已經(jīng)有了新的任務(wù)�！拔覀兿乱徊揭芯恳环N基因缺失和智力發(fā)育低下、有自虐傾向的疾病的關(guān)系，可以把兔子的這個基因去除，看培養(yǎng)出的兔子是否會有同樣的病癥�！崩钌苿傉f，弄清基因與疾病的關(guān)系對于研究這種遺傳病的致病機理和尋找有效的治療辦法至關(guān)重要。
緊張的工作，兩地的奔波，對他來說好像不算什么�！白鲎约涸敢庾龅氖虑闀惺裁磯毫δ亍！痹诶钌苿偪磥恚挥姓也坏椒较虻臅r候，才會感覺到壓力�！拔覀儑铱寺∩锛夹g(shù)的技術(shù)水平還是不錯的，因為中國的人手巧啊，在這個領(lǐng)域我們一定會有大的發(fā)展�！�
接下來的轉(zhuǎn)基因、基因打靶都已經(jīng)排在試驗日程上了，雖然他不愿意說多久之后會再傳佳音，但能感到，對接下來的工作，李善剛信心滿懷。
■采訪手記
李善剛不是一個健談的人，采訪中，只要話題稍稍偏離工作，他就會笑著提醒：“這就說得遠(yuǎn)了吧�！钡兄綎|人直爽性格的他，經(jīng)不住記者的旁敲側(cè)擊，難免也會聊聊自己。
如果除去“世界首例胎兔體細(xì)胞克隆實驗主持人”的頭銜，李善剛就像一個你身邊再普通不過的朋友。
采訪已近尾聲，和李善剛聊起了北京的樓市，不得不面對購房壓力的他，分析起房價起伏、樓市漲跌也是頭頭是道。他喜歡和7歲的兒子一起游戲卻沒有足夠的時間，曾經(jīng)著迷物理而現(xiàn)在只是偶爾翻翻《時間簡史》，希望回家過年卻因車票難求而作罷，回憶起當(dāng)老師的經(jīng)歷，也會為“只拿一支粉筆就能上講臺”而“沾沾自喜”……
·人物檔案
李善剛，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所國家畜禽分子遺傳育種中心博士后，世界首例胎兔體細(xì)胞克隆實驗主持人。1995年畢業(yè)于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，獲學(xué)士學(xué)位。1995年考入山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物繁殖學(xué)專業(yè)學(xué)習(xí)，參加了山東省自然科學(xué)基金“轉(zhuǎn)基因雞的研究”，獲得了國內(nèi)第一列嵌合體雞；1998年畢業(yè)于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)獲碩士學(xué)位；參加山東省自然基金重大項目“雞胚胎干細(xì)胞的建系及其遺傳操作的研究”。2002年考入上海交通大學(xué)發(fā)育生物學(xué)專業(yè)學(xué)習(xí)，2004年開始克隆兔的研究工作，2005年在國際上首次利用培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞克隆兔成功，2006年首次利用兔類胚胎干細(xì)胞克隆兔成功。2006年畢業(yè)于上海交通大學(xué)，獲醫(yī)學(xué)博士學(xué)位。同年7月進入中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，在合作導(dǎo)師杜立新教授的支持下開始博士后研究工作，從事養(yǎng)兔體細(xì)胞克隆和家畜繁殖性狀分子生物學(xué)機制研究工作。
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