兔病毒性出血癥及大腸桿菌混合感染

養(yǎng)兔

1 發(fā)病情況

廣州地區(qū)某兔場有種兔和斷奶仔兔800多只，發(fā)病1～2天后出現(xiàn)大量死亡，最多1天死亡70多只。發(fā)病后兔場獸醫(yī)用抗生素及磺胺類藥物治療，效果不理想，始終未能有效控制疫情。發(fā)病率和病死率分別為60%和80%左右。60日齡以下的仔兔病死數(shù)占總死亡數(shù)的32%(130/402)。?

2 臨床癥狀

病兔精神沉郁，食欲減退，呼吸急促，死前鳴叫，劃動四肢。病兔腹部臌脹，病初糞便細(xì)小，外包有透明、凍膠狀黏液，隨后排稀薄黃色糞便，以至棕色水樣腹瀉。并有特殊的臭味。肛門周圍及后肢等處和被毛粘有多量的糞便。?

3 病理變化

共剖檢病死兔12只，其中3只為60日齡以下的仔兔，9只為成年兔和種兔；剖檢病變基本一致，均見肺嚴(yán)重瘀血，脾腫大呈藍(lán)紫色，肝腫大呈淡黃色，腎出血呈暗紅色，氣管有血液泡沫，氣管環(huán)充血出血，膀胱充滿尿液。其中11只病死兔的胃內(nèi)充滿液體和氣體，胃黏膜出血，十二指腸充滿氣體，空腸、回腸和盲腸充滿膠凍樣液體，腸黏膜充血、水腫。?

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

(1)分別取12只病死兔的肝、脾和心血涂片，革蘭氏染色，鏡檢，結(jié)果11/12見有兩端鈍圓中等大小的革蘭氏陰性桿菌。

(2)接種培養(yǎng) 取12只病死兔的肝、脾分別接種于鮮血瓊脂平板和麥康凱平板，37℃培養(yǎng)24h，鮮血瓊脂平板上形成中等大小、圓形、乳白色、隆起、表面光滑的菌落，直徑約2 mm。麥康凱平板則形成中間凹陷的粉紅色菌落，直徑約1～2 mm。分別挑取這兩種培養(yǎng)基上的菌落涂片、革蘭氏染色，鏡檢，均為中等大小，革蘭氏陰性桿菌。從12只病死兔中共分離出11株細(xì)菌；11株細(xì)菌的菌落形態(tài)、培養(yǎng)特性一致。

(3)取這11株細(xì)菌的純培養(yǎng)物分別進(jìn)行生化試驗(yàn)，結(jié)果這11株細(xì)菌均能產(chǎn)生吲哚；M.R.試驗(yàn)陽性；V?P試驗(yàn)陰性；不利用枸櫞酸鹽；不產(chǎn)生硫化氫；能發(fā)酵乳糖、麥芽糖、葡萄糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣；能發(fā)酵甘露醇，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不發(fā)酵蔗糖；不液化明膠；不水解尿素酶；能還原硝酸鹽。初步鑒定為大腸埃希氏桿菌。

(4)取經(jīng)生化鑒定的純培養(yǎng)物，接種于肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18～20h，用此菌液皮下注射18～22 g小鼠5只，0.1 ml/只，24～36 h內(nèi)4只小鼠先后死亡，并從死亡的5只小鼠中回收到致病性大腸桿菌，培養(yǎng)特性和鏡檢形態(tài)與從病死兔中分離的菌株一致。而對照組2只小鼠7天后仍健活。分別取12只病死兔的肝、脾、肺和腎各小許，混合稱重，用組織搗碎機(jī)搗碎，按1∶10加入滅菌生理鹽水制成懸液，經(jīng)3 000 r/min離心20 min，取上清液加入青霉素、鏈霉素各?1 000 IU(μg)/ml?，置4℃冰箱內(nèi)作用4 h，然后用細(xì)菌濾器過濾，取濾液皮下注射2只體重2 kg左右的健康兔，?1 ml/?只。同時(shí)吸取濾液0.5 ml接種于肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)48 h，結(jié)果為陰性。注射病料濾液后的兔只，在40～72 h內(nèi)先后死亡，并現(xiàn)兔瘟典型的臨床癥狀及病理變化。取肝、脾接種于鮮血瓊脂平板及麥康凱平板，37℃溫箱培養(yǎng)48 h，結(jié)果均無任何細(xì)菌生長。

(5)以剖檢的12只病死兔的肝、脾、肺和腎等病料以及2只由上述實(shí)驗(yàn)中發(fā)病死亡兔的肝、脾、肺和腎制備14份1∶10懸液，分別以1%人的“O”型紅細(xì)胞作血凝試驗(yàn)，結(jié)果14份被檢樣本均呈明顯凝集，為陽性反應(yīng)。試驗(yàn)中同時(shí)設(shè)立正常兔的肝、脾提取物作陰性對照。


(6)取經(jīng)生化試驗(yàn)鑒定的大腸桿菌純培養(yǎng)物，用擴(kuò)散法，使用杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)的藥敏紙片，在普通瓊脂平板上進(jìn)行藥敏感試驗(yàn)，結(jié)果篩選出高敏藥物為頭孢唑啉和恩諾沙星；中度敏感藥物為氟哌酸和丁胺卡那霉素。?

5 防治措施

(1)隔離發(fā)病兔只，在遠(yuǎn)離兔場的地方加強(qiáng)力消毒靈、深埋病死兔只，用1∶500的強(qiáng)力消毒靈對兔舍環(huán)境、地面、籠具、用具、飼槽等進(jìn)行全面徹底消毒。

(2)用該場病死兔的肝、脾、肺等組織制成的兔瘟組織滅活苗和以該場分離的菌株制備的大腸桿菌滅活苗，對該場的兔群進(jìn)行緊急免疫接種，20～30日齡的仔兔，每只皮下注射大腸桿菌滅活苗1ml；30日齡以上的大、小兔每只皮下注射兔瘟組織滅活苗和大腸桿菌滅活苗各2 ml。

(3)對全場兔只注射恩諾沙星，連續(xù)3天；在全場兔群飼料中添加恩諾沙星，并在飲水中添加維生素C、葡萄糖和氟哌酸，連續(xù)飼喂10天。經(jīng)采取緊急免疫接種和藥物治療，7天后兔只死亡減少，10天后基本控制疫情，沒出現(xiàn)新的病例。